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產品簡介
產品名稱:免疫球蛋白G柱規格型號:Pharmacia HI-Trap Protein G柱,1mL(2支/包)品牌|廠商:GE Pharmacia
本標準規定了保健食品中免疫球蛋白 IgG的測定方法。 本標準適用于片劑、膠囊、粉劑類型保健食品中免疫球蛋白 IgG的測定。 本方法檢出限:當取樣量 0.1g,稀釋至25mL,進樣量20μL時,檢出濃度為0.5mg/mL。 原理 根據高效親和色譜的原理,在磷酸鹽緩沖液條件下免疫球蛋白 IgG與配基連接,在pH2.5的鹽酸甘氨酸條件下洗脫免疫球蛋白IgG。 試劑 流動相 A:pH6.5 0.05mol/L 磷酸鹽
適用范圍
本標準規定了保健食品中免疫球蛋白 IgG的測定方法。
本標準適用于片劑、膠囊、粉劑類型保健食品中免疫球蛋白 IgG的測定。
本方法檢出限:當取樣量 0.1g,稀釋至25mL,進樣量20μL時,檢出濃度為0.5mg/mL。
原理
根據高效親和色譜的原理,在磷酸鹽緩沖液條件下免疫球蛋白 IgG與配基連接,在pH2.5的鹽酸甘氨酸條件下洗脫免疫球蛋白IgG。
試劑
流動相 A:pH6.5 0.05mol/L 磷酸鹽緩沖液
流動相 B:pH2.5 0.05mol/L 甘氨酸鹽酸緩沖液
IgG標準貯備液:稱取IgG標準品(Sigma化學公司)0.0100g,用流動相A(3.1)溶解并定容至10.0mL,搖勻,濃度為1.0mg/mL。
IgG標準系列溶液:取IgG標準貯備液,用用流動相A(3.1)稀釋成含IgG 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0mg/mL的標準系列。臨用時配制。
儀器和設備
高效液相色譜儀具紫外檢測器和梯度洗脫裝置。
分析步驟
試樣處理:稱取 0.1g(精確至0.001g)試樣,用流動相A(3.1)稀釋至25.0mL,搖勻,通過0.45μm微孔濾膜后進樣。
5.2.1 先用5倍柱體積的重蒸水洗柱,再用10倍柱體積的流動相A(3.1)平衡柱,進樣,按洗脫程序進行洗脫。
5.2.2 HPLC參考條件
色譜柱: Pharmacia HI-Trap Protein G柱,1mL。
波長: 280nm
進樣量: 20μL
梯度洗脫表:
Time Flow mL/min A% B% Gradient
0 0.4 100 0 ※
4.5 0.4 100 0 6
5.5 0.4 0 100 6
15.0 0.4 0 100 6
15.5 0.4 100 0 6
22.0 0.4 100 0 6
| 蛋白質 G 柱 | Pharmacia HI-Trap Protein G柱,1mL(5支/包) |
| 蛋白質 G 柱 | Pharmacia HI-Trap Protein G柱,1mL(2支/包) |